微生物篩選
『壹』 微生物菌種的篩選
我認為兩者都可以用構建基因文庫的方法來篩選出其相關的基因。
基因文庫的構建,大致可分為5個步驟:
(1)染色體DNA的片段化 從某菌株中提取其染色體DNA,將其切割成一定大小的片段,插入噬菌體載體後被包裝成噬菌體顆粒。
(2)載體DNA的制備 選擇適當的噬菌體載體用限制酶切開,得到左、右兩臂,以便分別與染色體DNA片段的兩端連接。
(3)體外連接與包裝 將染色體DNA片段與載體DNA片段用T4 DNA連接酶連接。然後重組體DNA與噬菌體包裝蛋白在體外進行包裝。
(4)重組噬菌體感染大腸桿菌 將包裝得到的重組噬菌體在大腸桿菌內經增殖並裂解宿主細胞,產生的溶菌產物組成重組噬菌體克隆庫,即基因文庫。
(5)基因文庫的鑒定和擴增 對於文庫的鑒定,可以隨機挑選一定數量的克隆,用限制酶切、PCR或其他方法分析其重組體DNA來進行。
僅供參考!!!
『貳』 從自然界分離篩選微生物菌種的基本程序包括哪些
⑴采樣:從適合微生物生長的環境采樣
⑵富增:根據其特性選擇性的富集目的微生物
;⑶初篩:採用平板對富集的目的微生物純種分離,確定其活性選出高產菌種,一般200株;
⑷復篩:對第一次分離的微生物菌種,再次篩選,一般40株;
⑸二級復篩:從40株選出5株⑹確定菌種,進行生產性能測定.
『叄』 功能微生物篩選過程及應用價值
菌株分離(separation)就是將一個混雜著各種微生物的樣品通過分離技術區分開,並按照實際要求和菌株的特性採取迅速、准確、有效的方法對他們進行分離、篩選,進而得到所需微生物的過程。菌株分離、篩選(screening)雖為兩個環節,但卻不能絕然分開,因為分離中的一些措施本身就具有篩選作用。工業微生物產生菌的篩選一般包括兩大部分:一是從自然界分離所需要的菌株,二是把分離到的野生型菌株進一步純化並進行代謝產物鑒別。 ? {cF'RB.
在實驗工作中,為使篩選達到事半功倍的效果,總的說來可從以下幾個途徑進行收集和篩選: 4jis\W}%L3
(1)向菌種保藏機構索取有關的菌株,從中篩選所需菌株。 ^5u}
(2)由自然界採集樣品,如土壤、水、動植物體等,從中進行分離篩選。 O|%><I?I
(3)從一些發酵製品中分離目的菌株,如從醬油中分離蛋白酶產生菌,從酒醪中分離澱粉酶或糖化酶的產生菌等。該類發酵製品經過長期的自然選擇,具有悠久的歷史,從這些傳統產品中容易篩選到理想的菌株。 rN$_(%m_N
菌株的分離和篩選一般可分為采樣、富集、分離、產物鑒別幾個步驟。 8*4X%a=O f
第一節 含微生物樣品的採集 Q?7U iTZ
自然界含菌樣品極其豐富,土壤、水、空氣、枯枝爛葉、植物病株、爛水果等都含有眾多微生物,種類數量十分可觀。但總體來講土壤樣品的含菌量最多。 G+^HZ4jg
一、從土壤中采樣 $0D]d.w=
土壤由於具備了微生物所需的營養、空氣和水分,是微生物最集中的地方。從土壤中幾乎可以分離到任何所需的菌株,空氣、水中的微生物也都來源於土壤,所以土壤樣品往往是首選的採集目標。一般情況下,土壤中含細菌數量最多,且每克土壤的含菌量大體有如下的遞減規律:細菌(108)>放線菌(107)>黴菌(106)>酵母菌(105)>藻類(104)>原生動物(103),其中放線菌和黴菌指其孢子數。但各種微生物由於生理特性不同,在土壤中的分布也隨著地理條件、養分、水分、土質、季節而有很大的變化。因此,在分離菌株前要根據分離篩選的目的,到相應的環境和地區去採集樣品。 M*8Ef^-U`t
(一)根據土壤特點 8_8 R$ =V
1.土壤有機質含量和通氣狀況 &'c1"%*%8>
一般耕作土、菜園土和近郊土壤中有機質含量豐富,營養充足,且土壤成團粒結構,通氣飽水性能好,因而,微生物生長旺盛,數量多,尤其適合於細菌、放線菌生長。山坡上的森林土,植被厚,枯枝落葉多,有機質豐富,且陰暗潮濕,適合黴菌、酵母菌生長繁殖,微生物數量相應也比較少。 VCNg`6!x
從土層的縱剖面看,1~5cm的表層土由於陽光照射,蒸發量大,水分少,且有紫外線的殺菌作用,因而微生物數量比5~25cm土層少;25cm以下土層則因土質緊密,空氣量不足,養分與水分缺乏,含菌量也逐步減少。因此,采土樣最好的土層是5~25cm。一般每克土中含菌數約幾十萬到幾十億個,並且各種類型的細菌和放線菌幾乎都能分離到。如好氣芽孢桿菌、假單胞菌、短桿菌、大腸桿菌、某些嫌氣菌等。但總的說來酵母菌分布土層最淺,約5~10cm,黴菌和好氧芽孢桿菌也分布在淺土層。 \@GA;~x.b
2.土壤酸鹼度和植被狀況 -fT]}T6=
土壤酸鹼度會影響微生物種類的分布。偏鹼的土壤(pH7.0~7.5)環境,適合於細菌、放線菌生長。反之在偏酸的土壤(pH7.0以下)環境下,黴菌、酵母菌生長旺盛。由於植物根部的分泌物有所不同,因此,植被對微生物分布也有一定的影響。如番茄地或腐爛番茄堆積處有較多維生素C生產菌。葡萄或其他果樹在果實成熟時,其根部附近土壤中酵母菌數量增多。豆科植物的植被下,根瘤菌數量比其他植被下占優勢。 m:)v>vu
3.地理條件 bh3}[O,L A
南方土壤比北方土壤中的微生物數量和種類都要多,特別是熱帶和亞熱帶地區的土壤。許多工業微生物菌種,如抗生素產生菌,尤其是黴菌、酵母菌,大多從南方土壤中篩選出來。原因是南方溫度高,溫暖季節長,雨水多,相對濕度高,植物種類多,植被覆蓋面大,土壤有機質豐富,造成得天獨厚的微生物生長環境。 +0;6.PK
4.季節條件 75jq+O_:
不同季節微生物數量有明顯的變化,冬季溫度低,氣候乾燥,微生物生長緩慢,數量最少。到了春天隨著氣溫的升高,微生物生長旺盛,數量逐漸增加。但就南方來說,春季往往雨水多,土壤含水量高,通氣不良,即使有微生物所需的溫度、濕度,也不利於其生長繁殖。隨後經過夏季到秋季,約有7~10個月處在較高的溫度和豐富的植被下,土壤中微生物數量比任何時候都多,因此,秋季采土樣最為理想。 /3L1Un*
(二)采樣方法 zVd2kuI&?
用取樣鏟,將表層5cm左右的浮土除去,取5~25處的土樣10~25,裝入事先准備好的塑料袋內紮好。北方土壤乾燥,可在10~30處取樣。給塑料袋編號並記錄地點、土壤質地、植被名稱、時間及其他環境條件。一般樣品取回後應馬上分離,以免微生物死亡。但有時樣品較多,或到外地取樣,路途遙遠,難以做到及時分離,則可事先用選擇性培養基做好試管斜面,隨身帶走。到一處將取好的土樣混勻,取3~4撒到試管斜面上,這樣可避免菌株因不能及時分離而死亡。 &Op, ?\
二.根據微生物生理特點采樣 wbyY?tH
1.根據微生物營養類型 %r=uS.+hrF
每種微生物對碳\氮源的需求不一樣,分布也有差異。研究表明,微生物的營養需求和代謝類型與其生長環境有著很大的相關性。如森林土有相當多枯枝落葉和腐爛的木頭等,富含纖維素,適合利用纖維素作碳源的纖維素酶產生菌生長;在肉類加工廠附近和飯店排水溝的污水、污泥中,由於有大量腐肉、豆類、脂肪類存在,因而,在此處采樣能分離到蛋白酶和脂肪酶的產生菌;在麵粉加工廠、糕點廠、酒廠及澱粉加工廠等場所,容易分離到產生蛋白酶、糖化酶的菌株。若要篩選以糖質為原料的酵母菌,通常到蜂蜜、蜜餞、甜果及含糖濃度高的植物汁液中采樣。在篩選果膠酶產生菌時,由於柑橘、草莓及山芋等果蔬中含有較多的果膠,因此,從上述樣品的腐爛部分及果園土中采樣較好。若需要篩選代謝合成某種化合物的微生物,從大量使用、生產或處理這種化合物的工廠附近採集樣品,容易得到滿意的結果。在油田附近的土壤中就容易篩選到利用碳氫化合物為碳源的菌株。Hartman等人曾從乙烯氯化物的工廠附近分離到一株以乙烯氯化物為碳源和能源的分枝桿菌。含1%乙烯氯化物的空氣通過該菌培養可除去93%的毒性。也有人從含油污泥中篩選出能以20#機械潤滑油為惟一碳源的3株石油降解菌菌株,分別為動膠菌屬(Zoogloea sp.)、氮單胞菌屬(Azomonas sp.)和假單胞菌屬(Pseudomonas sp.)。當然,也可將一種需要降解的物質作為樣品中微生物的惟一碳源或氮源進行富集,然後分離篩選。 X2}\i5{
此外,不少微生物對碳源的利用是不完全專一的,如以油脂為碳源的某些脂肪酶產生菌同樣也可以分解澱粉或其他糖類物質獲得能源而生長。以石油等碳氫化合物為碳源的油田微生物,也可以利用一些糖類為碳源。具有以上特性的微生物在一般土壤、水、及其他樣品中也會存在。不過數量較少。 \ ExM.T
2.根據微生物的生理特性 w-C ~ Ik
在篩選一些具有特殊性質的微生物時,需根據該微生物獨特的生理特性到相應的地點采樣。如篩選高溫酶產生菌時,通常到溫度較高的南方,或溫泉、火山爆發處及北方的堆肥中採集樣品;分離低溫酶產生菌時可到寒冷的地方,如南北極地區、冰窖、深海中采樣;分離耐壓菌則通常到海洋底部采樣。因為深海中生活的微生物能耐很高的靜水壓,如從海中篩到一株水活微球菌(Micrococcus aquivivus),它能在600個大氣壓下生長。分離耐高滲透壓酵母菌時,由於其偏愛糖分高、酸性的環境,一般在土壤中分布很少,因此,通常到甜果、蜜餞或甘蔗渣堆積處采樣。如有人曾在花蜜中分離到一株能耐30%高糖的耐高滲透壓的酵母菌。 AE={P*g
三、特殊環境下采樣 @{iws@.
1.局部環境條件的影響 jr bEJ.
值得注意的是微生物的分布除了本身的生理特性和環境條件綜合因素的影響之外,還要受局部環境條件的影響。如北方氣候寒冷,年平均溫度低,高溫微生物相對較少。但在該地區的溫泉或堆肥中,卻會出現為數眾多的高溫微生物。氧氣充足的土層中按理只適合於好氧菌生長,實際上也有一些嫌氣菌生活,原因是好氣菌生長繁殖消耗了土層中大量氧氣,為嫌氣菌創造了局部生長的有利環境,故一般土壤中也能分離到嫌氣菌。 X/ gIH/
海洋對於微生物來說是一個特殊的局部環境,盡管許多微生物也是經河水、污水、雨水或塵埃等途徑而來,但由於海洋獨特的高鹽度、高壓力、低溫及光照條件,使海洋微生物具備特殊的生理活性,相應也產生了一些不同於陸地來源的特殊產物。前蘇聯學者發現,20%~50%的海鞘、海參體內的微生物可產生具有細菌毒性和殺菌活性的化合物。此外,美國馬里蘭大學也曾從海綿體內的共生或共棲的細菌中分離到抗白血病、鼻咽癌的抗癌物質。日本發現深海魚類腸道內的嗜壓古細菌,80%以上的菌株可以生產EPA 和DHA,最高產量可達36%和24%。筆者從鱈魚腸道中分離到一株pj20細菌,產EPA14.78mg/L,在15℃培養時EPA占脂肪酸的12.7%。日本也從海洋Thraustochvtrium aureum中篩選到一株產DNA達290mg/L的菌株。從海洋中采樣時,可參考其中不同種類微生物的分布規律:表層多為好氣異養菌,底層由於有機質豐富,硫化氫含量高,厭氣性腐敗菌和硫酸鹽還原菌較多,兩層中則多為紫硫菌。 u_;*Ay
具有特殊性質的微生物通常分布在一些特殊的環境中。如得克薩斯州中南部的一個岩洞中存在著大量嗜鹼性的,能進行氨氧化和產幾丁質酶的微生物,其原因是這里生活這2000萬只蝙蝠,它們每晚吃釣5萬lb(磅)昆蟲,其排泄物造成了洞內0m深的豐富營養層,這種特殊的環境對該種微生物起了選擇和富集的作用。還有人從侵蝕木船的一種蠕蟲腸道中分離到既能固氮又能降解纖維素的微生物。從考拉(Koala)熊腸中也曾分離到萜烯分解酶的產生菌,這可能因為考拉專吃含有高萜烯的桉樹類植物,給該種微生物創造了一個適宜的生長環境。美國從用硝酸處理過的花生殼中分離到一株節桿菌,該菌以木質素為唯一碳源,它對處理過的花生殼的消化率可達到63%,再加入釀酒酵母使其蛋白質含量達到13.6%,可作為牛、豬、雞飼料的添加劑。 |NJe4lw+?
2.極端環境條件的影響 MqGF~h|+
微生物一般在中溫、中性pH條件下生長。但在絕大多數微生物所不能生長的高溫、低溫、高酸、高鹼、高鹽或高輻射強度的環境下,也有少數微生物存在,這類微生物被稱為極端微生物。生活所處的特殊環境,導致它們具有不同與一般微生物的遺傳特性、特殊結構和生理機能,因而在冶金、采礦及生產特殊酶制劑方面有著巨大的應用價值。 Z.am^Q^Y!
嗜冷菌(thermophiles)的最適生長溫度為15℃,在0℃也可生長繁殖,最高溫度不超過20℃。主要分布於寒冷的環境中,如南北兩極地區、冰窟、高山、深海和土壤等低溫環境中。這類微生物在低溫發酵時可生產許多風味食品且可節約能源及減少中溫菌的污染。最適生長pH在8.0以上,通常在pH9~10之間的微生物,稱之為嗜鹼菌(alkaliphiles)。大量不同類型的嗜鹼菌已經從土壤、鹼湖、鹼性泉甚至海洋中分離得到。由於大部分鹼湖伴有高鹽,許多嗜鹼菌同時也是嗜鹽菌。該類菌所產生的酶如耐鹼蛋白酶和鹼性纖維素酶可作為洗滌劑的舔加成分,也可將鹼性澱粉酶用於紡織品工業。嗜鹼菌中的基因還可以用來調節其他細菌中基因產物的表達和分泌。嗜熱微生物是嗜熱菌最好的來源。有人從溫泉和海底火山口分離出了極端嗜熱菌。從義大利境內的噴硫磺氣的火山口中分離到一種原始的微生物,在pH2和90℃時生長最好,其代謝類型極不尋常,既能作為耗氧型自養菌將硫氧化成硫酸,使自己增殖,又能作為厭氧菌用氫還原硫,生成H2S。 l=8)_z;~D
第二節 含微生物樣品的富集培養 $#2ik~]>
富集(enrichment)培養是在目的微生物含量較少時,根據微生物的生理特點,設計一種選擇性培養基,創造有利的生長條件,使目的微生物在最適的環境下迅速地生長繁殖,數量增加,由原來自然條件下的劣勢種變成人工環境下的優勢種,以利分離到所需要的菌株。 v_)a=I%o&2
富集培養主要根據微生物的碳、氮源、pH、溫度、需氧等生理因素加以控制。一般可從以下幾個方面來進行富集。 ;ZHKTOoK
一、控制培養基的營養成分 )67_yHW
微生物的代謝類型十分豐富,其分布狀態隨環境條件的不同而異。如果環境中含有較多某種物質,則其中能分解利用該物質的微生物也較多。因此,在分離該類菌株之前,可在增殖培養基中人為加入相應的底物作惟一碳源或氮源。那些能分解利用的菌株因得到充足的營養而迅速繁殖,其他微生物則由於不能分解這些物質,生長受到抑制。當然,能在該種培養基上生長的微生物並非單一菌株,而是營養類型相同的微生物群。富集培養基的選擇性只是相對的,它只是微生物分離中的一個步驟。 sDT(3{)L7
現舉兩例,如要分離水解酶產生菌,可在富集培養基中以相應底物為惟一碳源,加入含菌樣品,給目的微生物以最佳的培養條件(pH、溫度、營養、通氣等)進行培養。能分解利用該底物的菌類得以繁殖,而其他微生物則因得不到碳源無法生長,菌數逐漸減少。此時分離將得到所需的微生物。又如要分離耐高滲酵母菌,由於該類菌在一般樣品中含量很少,富集培養基和培養條件必須嚴密設計。首先要到含糖分高的花蜜、糖質中去取樣。富集培養基為5%~6%的麥牙汁,30%~40%葡萄糖,pH3~4,在20~25℃溫度下進行培養,可以達到富集的目的。 , mEFp_a+
在富集培養時,還需根據微生物的不同種類選用相應的富集培養基,如澱粉瓊脂培養基通常用於絲狀真菌的增殖,配方為(%):可溶性澱粉4,酵母浸膏0.5,瓊脂2,pH6.5~7.0。在配製時要特別注意酵母浸膏加量,過多會刺激菌絲生長,而不利於孢子的產生。 Y:[WwX|
根據微生物對環境因子的耐受范圍具有可塑性的特點,可通過連續富集培養的方法分離降解高濃度污染物的環保菌。如以苯胺作惟一碳源對樣品進行富集培養,待底物完全降解後,再以一定接種量轉接到新鮮的含苯胺的富集培養液中,如此連續移接培養數次。同時將苯胺濃度逐步提高,便可得到降解苯胺占優勢的菌株培養液,採用稀釋塗布法或平板劃線法進一步分離,即可得到能降解高濃度苯胺的微生物。移種的時間既可根據底物的降解情況,也可通過微生物的生長情況確定。如在分離環己烷降解菌時,樣品經環己烷為惟一碳源的培養基富集後,培養液由原來的無色變為渾濁的乳白色。同時錐行瓶壁上也可觀察到微生物的生長情況。此時可以2%的接種量移入新鮮的富集培養基中繼續培養。連續富集培養的方法雖耗時較長,有時甚至需要6~7個月,但效果較好。通過該方法分離DDT、甲基對硫磷(MP)及其他一些污染物的分解菌,也都取得了滿意的結果。 W6ZXb_X
二、控制培養條件 OSk:njyC[
在篩選某些微生物時,除通過培養基營養成分的選擇外,還可通過它們對pH、溫度及通氣量等其他一些條件的特殊要求加以控制培養,達到有效的分離目的。如細菌、放線菌的生長繁殖一般要求偏鹼(7.0~7.5),黴菌和酵母菌要求偏酸(4.5~6)。因此,富集培養基的pH值調節到被分離微生物的要求范圍不僅有利於自身生長,也可排除一部分不需要的菌類。 P1;T-.X~&
分離放線菌時,可將樣品液在40℃恆溫預處理20分鍾,有利於孢子的萌發,可以較大的增加放線菌數目,達到富集的目的。 ,cPNZ-%
篩選極端微生物時,需針對其特殊的生理特性,設計適宜的培養條件,達到富集的目的。 3p{N7/z(
一般所篩選的微生物通常是好氧菌,但有時也需分離厭氧菌。因嚴格厭氧菌不僅可省略通氣、攪拌裝置,還可節省能耗。這時除了配置特殊的培養基外,還需准備特殊的培養裝置,創造一個有利於厭氧菌的生長環境,使其數量增加,易於分離。 WJ=DTON
三、抑制不需要的菌類 vA@Kb3 ,
在分離篩選的過程中,除了通過控制營養和培養條件,增加富集微生物的數量以有利於分離外,還可通過高溫、高壓、加入抗生素等方法減少非目的微生物的數量,使目的微生物的比例增加,同樣能夠達到富集的目的。 Kdh(vNB>
從土壤中分離芽孢桿菌時,由於芽孢具有耐高溫特性,100℃很難殺死,要在121℃才能徹底死亡。可先將土樣加熱到80℃或在50%乙醇溶液中浸泡1h,殺死不產芽孢的菌種後再進行分離。在富集培養基中加入適量的膽鹽和十二烷基磺酸鈉可抑製革蘭陽性菌的生長,對革蘭陰性無抑製作。分離厭氧菌時,可加入少量硫乙醇酸鈉作為還原劑,它能使培養基氧化還原電勢下降,造成缺氧環境,有利於厭氧菌的生長繁殖。 9+"D8 J7
篩選黴菌時,可在培養基中加入四環素等抗生素抑制細菌,使黴菌在樣品的比例提高,從中便於分離到所需的菌株;分離放線菌時,在樣品懸浮液中加入10滴10%的酚或加青黴素(抑制G+菌)、鏈黴素(抑制G-菌)各30~50U/ml,以及丙酸鈉10μg/ml(抑制黴菌類)抑制黴菌和細菌的生長。另外據報道,重鉻酸鉀對土壤真菌、細菌有明顯的抑製作用,也可用於選擇分離放線菌。在分離除鏈黴菌以外的放線菌時,先將土樣在空氣中乾燥,再加熱到100℃保溫1h,可減少細菌和鏈黴菌的數量。分離耐高濃度酒精和高滲酵母菌時,可分別將樣品在高濃度酒精和高濃度蔗糖溶液中處理一段時間,殺死非目的微生物後再進行分離。 LO]D XW 9
對於含菌數量較少的樣品或分離一些稀有微生物時,採用富集培養以提高分離工作效率是十分必要的。但是如果按通常分離方法,在培養基平板上能出現足夠數量的目的微生物,則不必進行富集培養,直接分離、純化即可。 3{RuR+yi
第三節 微生物的分離 }uo5rB5D
經富集培養以後的樣品,目的微生物得到增殖,佔了優勢,其他種類的微生物在數量上相對減少,但並未死亡。富集後的培養液中仍然有多種微生物混雜在一起,即使佔了優勢的一類微生物中,也並非純種。例如同樣一群以油脂為碳源的脂肪酶產生菌,有的是細菌,有的是黴菌,有的是芽孢桿菌,有的不產芽孢,有的生產能力強,有的生產能力弱等等。因此,經過富集培養後的樣品,也需要進一步通過分離純化,把最需要的菌株直接從樣品中分離出來。 Mm`jk%:%]
『肆』 如何篩選能高效降解石油的微生物
Ⅰ(1)土壤取樣,應從含石油多的土壤中採集.(2)從功能上分,應選用以石油為唯一碳源的選擇培養基進行篩選和純化該類微生物,常用的接種方法平板劃線法和稀釋塗布平板法.(3)該類微生物是厭氧微生物,接種後應密封培養,一段時間後選擇降油圈大的菌落進行培養可獲得高效菌株. Ⅱ.(1)圖示蘭花培養的技術屬於植物組織培養技術,③表示脫分化過程,④表示再分化過程,組織培養技術的原理是植物細胞的全能性.(2)MS培養基中需要添加植物激素,生長素和細胞分裂素用量的比值高有利於根的分化.(3)植物組織培養成功的關鍵是必須保證整個過程是無菌操作.故答案為: Ⅰ(1)長期被石油污染(含石油多的)(2)選擇 石油 高壓蒸汽滅菌 平板劃線法 稀釋塗布平板法(3)厭氧型 降油圈大的菌落 Ⅱ(1)植物組織培養技術 植物細胞的全能性 脫分化 再分化(2)植物激素 高(3)無菌
『伍』 簡述產酶微生物的分離和篩選
配製篩選培養基,篩選培養基的配製根據你所要分離的酶。
通過在選擇培養基上的長勢,初步獲得所需微生物。
對獲得的微生物進行進一步篩選。
可以通過生理生化反應,液相色譜等獲得所需微生物。
『陸』 微生物篩選原理
用選擇培養基,調節培養基的某些條件,使你想要的微生物能正常存活,而不想要的微生物不能存活。或者是特定的菌落染色,進而分離。
例:在進行纖維素分解菌的篩選時,可以在培養基里加入剛果紅(一種染料,可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物,但並不和水解後的纖維二塘和葡萄糖發生這種反應。)當我們在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時,剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物,而無法和被分解菌分解的纖維素形成剛果紅——纖維素復合物,培養基中就會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈,這樣我們就可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌了。
『柒』 如何從土壤中分離篩選具有抑菌功能的微生物,設計分離方案
1,首先要明確准備篩選光譜還是窄譜的抑菌微生物,其次要選好你的指示菌
2,一般採用透明圈法進行抑菌微生物的篩選。
步驟:1,培養基、牛津杯的滅菌;
2,培養基冷卻至不燙死指示菌的溫度後,在其中加入2%左右的指示菌
3,混合均勻後倒平板
4,平板凝固後在其上加入牛津杯,並在牛津杯中加入你篩選的菌懸液
5,培養
6,觀察透明圈大小
7,透明圈有且明顯較大的,其中菌就是擬篩選的菌
『捌』 微生物篩選營養缺陷型有什麼意義 如題 重點說科研方面的意義 謝謝
微生物中篩選營養缺陷型一般有兩個意義:
1、營養缺陷型有可能是突變體,要篩選基因突變體第一步一般都會從營養缺陷開始.
2、主要應用於篩選轉基因受體.
『玖』 什麼是微量高通量微生物篩選法其創新點在什麼地方
近年來,一種稱作微量高通量微生物篩選法已在歐洲等實驗室採用。其基本方法是以96孔塑料培養板作大量培養的容器,每孔可先加入2ml培養液,再用多點(12點)接種器快速接種純菌株,每小時約可接40000個不同變異株,每天可篩選2萬~3萬株,經適當培養後,可快速對每孔中的代謝產物進行自動檢測,工效極高。
『拾』 工業微生物產生菌的分離篩選方法有哪些
工業微生物產生菌的篩選一般包括兩大部分:一是從自然界分離所需要的菌株,二是把分離到的野生型菌株進一步純化並進行代謝產物鑒別。
在實驗工作中,為使篩選達到事半功倍的效果,總的說來可從以下幾個途徑進行收集和篩選:
(1)向菌種保藏機構索取有關的菌株,從中篩選所需菌株。
(2)由自然界採集樣品,如土壤、水、動植物體等,從中進行分離篩選。
(3)從一些發酵製品中分離目的菌株,如從醬油中分離蛋白酶產生菌,從酒醪中分離澱粉酶或糖化酶的產生菌等。該類發酵製品經過長期的自然選擇,具有悠久的歷史,從這些傳統產品中容易篩選到理想的菌株。 菌株的分離和篩選一般可分為采樣、富集、分離、產物鑒別幾個步驟。