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1. Western Blot試驗方面的問題在哪裡可以找到詳細介紹，誰能告訴我一些的生物科技論壇

樓主可以到生物幫那裡了解這方面的信息的。生物幫擁有覆蓋所有實驗領域的精品技術文件，圖文並茂的提供生物領域的學科知識、實驗技術方法與技巧等，協助解決科研工作中相關技術問題。 Western印跡要想做的好，當然每個步驟都不能馬虎 配膠 這些小孔的孔徑隨 「雙丙烯醯胺～丙烯醯胺」 比率的增加而變小，比率接近 1：20 時孔徑達到最小值。SDS聚丙烯醯胺凝膠大多按「雙丙烯醯胺～丙烯醯胺」為1：29 配製，試驗表明它能分離大小相差只有3% 的蛋白質。 分離膠及濃縮膠均可事先配好(除AP及TEMED外)，過濾後作為儲存液避光存放於4℃，可至少存放1個月，臨用前取出室溫平衡(否則凝膠過程產生的熱量會使低溫時溶解於儲存液中的氣體析出而導致氣泡，有條件者可真空抽吸3分鍾)，加入10%AP(0.7~0.8:100, 分離膠濃度越高AP濃度越低，15%的分離膠可用到0.5:100)及TEMED(分離膠用0.4:1000, 15%的可用到0.3:1000，濃縮膠用0.8：1000) PAGE配膠的試劑和配方比例對電泳結果的質量當然有決定性的影響，這個配膠的比例，在《分子克隆》上有詳細的論述，相信大家都不難查到。容易忽視的問題主要在於過硫酸銨(AP)一定要新鮮——最好用小指管配AP(寫日期)保存在-20度，超過2周的AP扔掉算了，或者已經反復打開使用多次的AP都別用， 灌入2/3的分離膠後應立即封膠，膠濃度<10%時可用0.1%的SDS封，濃度>10%時用水飽和的異丁醇或異戊醇，也可以用0.1%的SDS。封膠後切記，勿動。 如用醇封膠需用大量清水及ddH2O沖洗干凈，然後加少量0.1%的SDS，目的是通過降低張力清除殘留水滴 10%的AP最好現配現用，如在4℃存放勿超過兩周。30%的丙烯醯胺如有沉澱，最好棄掉 過硫酸銨(APS)(10%;w/v) 取3g過硫酸銨，溶於去離子水，至終體積為30mL。此溶液4℃下在短暫的數日內是穩定的，但建議，對每一組新膠均應新鮮配製 但搖動溶液時不要過於劇烈以免引入過多地氧氣 可以到生物幫那裡詳細的了解一下，我找到了相關專題，可以幫到你。 please click to connect www.bio1000.com/zt/protein/214560.html . can help you 樣品處理 先制備蛋白樣品，後灌注壓縮膠，壓縮膠灌注後應在20~40min內使用。 上樣前蛋白樣品最好離心，上樣量不宜過多，以免看結果時，每個條帶都彎彎地「笑」你貪多嚼不爛哦。其他的操作，按照說明控制電流，不要過多重復使用電泳Buffer(別小氣，重復使用會降低緩沖能力的)，好像基本不會出問題了。當預染的Marker告訴你，你要分辨的蛋白已經到達最佳分辨區——分離膠的2/3處，OK，電泳結束了。 電泳樣品假如樣品緩沖液後,要在沸水中煮3-5分鍾使SDS與蛋白質充分結合形成SDS-蛋白質復合物 溴酚藍指示劑是一個較小的分子,可以自由通過凝膠孔徑,所以它顯示著電泳的前沿位置,當指示劑到達凝膠底部時,即可停止電泳. 另外樣品處理液中也可加入適量的甘油或蔗糖以增大溶液密度,使加樣時樣品溶液可以沉入樣品加樣槽底部. 樣品制備是關鍵步驟，要求盡可能的獲得所有蛋白質，應注意以下問題： 1：在合適的鹽濃度下，應保持蛋白質的最大溶解性和可重復性。 2：選擇合適的表面活性劑和還原劑，破壞所有非共價結合的蛋白質復合物和共價鍵二硫鍵，使其形成一個各自多肽的溶液。 3：盡量去除核酸，多糖，脂類等干擾分子。 4：防止蛋白質在樣品處理過程中的人為的修飾，制備過程應在低溫下進行，以避免細胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑) 5：樣品建議分裝成合適的量，然後冷凍乾燥或直接以液體狀態置-80℃中保存，但要注意不要反復凍融。 電泳 所有蛋白樣品調至等濃度後上樣，樣品兩側的泳道用等體積的1×loading buffer上樣，Marker也用1×loading buffer調整至與樣品等體積 低電壓短時間的預電泳(恆壓10-20V,20-30min)，清除凝膠內的雜質，疏通凝膠孔徑以保證電泳過程中電泳的暢通 以初始電壓為45V時的電流強度進行穩流電泳，當電壓達65V時改為穩壓電泳 注意加樣時間要盡量短，以免樣品擴散，為避免邊緣效應，可在未加樣的孔中加入等量的樣品緩沖液 凝膠上所加電壓為8V/cm。當染料前沿進入分離膠後，把電壓提高到15V/cm 轉膜 由於轉膜過程中的氣泡問題對於實驗結果有很大的影響 切記：每層之間用滴管將其中的氣泡全部趕出，決不允許氣泡存在。 將PVDF膜先在甲醇中浸泡幾分鍾,再轉移到轉膜緩沖液中處理15min。 PVDF膜，125-200 ug/cm2(適合於SDS存在下與蛋白質的結合) 另外提醒一句：由於NC膜上結合的蛋白會因為一些去污劑而被代替，因此在封閉時最好使用較溫和的Tween20，而且濃度不要超過0.3%(據說0.05%效果最好) PVDF膜特別注意的是需要100%甲醇預處理(不超過15秒)再用緩沖液平衡，才能用 如果WB前沒有可參考的資料——比如不知道是否有表達，比如抗體少還要摸條件(稀釋度)，可以用剪膜剩下的邊角料來先做幾組點雜交摸條件，省點時間省點試劑; 切個小角是常用的方法。膜上要做好標記，識別正反面和上下 膜徹底浸潤後顏色會變深一點，任何白點或者斑都是沒有完全浸潤的標志，會影響轉膜的 半干電轉移要防止過熱 轉膜後，膜上其他的空白位置需要用封閉液封閉。Western的靈敏度某種程度上受限於封閉做的好不好 切記。封閉時間和封閉劑的量都要足夠。封閉不完全，後面就全白忙活了

2. 生物醫學工程，單克隆抗體的制備及應用方面的資料哪裡會有

單克隆抗體是高度均質性的特異性抗體，由一個識別單一抗原表位的B細胞克隆所分泌。單克隆抗體的制備在生物學、醫學方面有重要意義。你可以到生物幫找單克隆抗體的制備及應用方面的資料，生物幫是一個比較全面的生物科學網站。

有時間的話可以去（
www.bio1000.com/
）查下，我在那兒看到過，文檔中詳細介紹了抗體的結構與功能、單克隆抗體的制備和生產和單克隆抗體的改造和應用。

3. X-gal和IPTG溶液配製方法哪位知道這類生物實驗知識哪裡可以了解到

我在生物幫那兒幫你找到了X-gal和IPTG溶液配製方法，你看下吧X-gal溶液配製方法X-gal為5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲醯胺溶解X-gal配製成的20mg/ml的貯存液。保存於一玻璃管或聚丙烯管中，裝有X-gal溶液的試管須用鋁箔封裹以防因受光照而被破壞，並應貯存於-20℃。X-gal溶液無須過濾除菌。IPTG溶液配製方法IPTG為異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量為238.3），在8ml蒸餾水中溶解2g IPTG後，用蒸餾水定容至10ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存於-20℃。 如果還有關於實驗的問題也可以去（ MALINGS.www.bio1000.com/ ）那裡查找的，生物幫那裡的技術文檔，視頻教程可以幫助你解決遇到的問題。

4. 利用晶元靈長類可腦電波控制虛擬手臂這方面的介紹哪裡有

目前，在美國杜克大學的神經系統研究中心，第一次演示了一個靈長類大腦和一個虛擬身體之間的雙向聯系，科學家訓練兩只猴子學習只使用腦電波來移動虛擬手臂和分辨虛擬物體的紋路。實驗過程猴子的任何身體部分都沒有參與操作，這就表明將來脊椎神經損傷嚴重的癱瘓患者可以利用這個技術，不僅能重新移動也能重新恢復觸覺。這一研究成果發表於10月5日出版的《自然》雜志。你可以去生物幫那裡了解，生物幫是生物行業門戶網站，那兒有全面的生命科學領域產品、技術文檔、視頻、還可以在線交流。
被植入電腦晶元的猴子能夠看到和移動虛擬物品並分辨物體的紋路，這表明在幫助嚴重癱瘓病人再一次接觸社會的探索上更進了一步。杜克大學醫學和哲學博士米格爾-尼可雷里斯說：「在不久的將來，四肢癱瘓的病人將利用這項技術，不僅能夠移動手臂和再次行走，而且能夠感覺到手中物品的紋路，或者通過安裝的機器肢體能夠體會到紋路的細微差別。」他是美國杜克大學醫學中心神經生物學教授和神經系統研究中心主任，在這一領域有較深的資歷。猴子們通過腦電波控制虛擬手臂放到虛擬物品的表面，並且通過接觸能夠分辨它們的紋路。盡管研究中使用的虛擬物品外觀相同，它們被設計成不同的紋路來測試猴子是否能通過腦電波直接控制虛擬手臂分辨其中不同。虛擬物品的紋路以微弱的電信號傳輸到猴子的大腦，三種不同的電信號就代表三種不同的紋路。可參考：please click to connect www.bio1000.com/zt/dna/3782.html .hope that i can help you尼可雷里斯說：「這是第一次演示大腦和虛擬身體之間通過電腦晶元建立雙向的直接連接，當虛擬手臂觸摸並產生反饋信號，傳送的的電信號刺激動物腦皮層的另外一個區域，從而實現腦電波直接控制虛擬身體。」「我們期待未來的幾年內這項技術能夠幫助那些不能移動的或者從未體驗過外面世界的病人重新獨立生活。這也是第一次我們觀察大腦控制虛擬手臂接觸物體的同時大腦接收虛擬手臂獲得的描述物體細微結構的電信號」，尼可雷里斯補充道。由猴子大腦運動皮層的50-200個神經元群體組合成的腦電波控制虛擬手臂的移動，與此同時，觸覺皮層成千上萬的神經元從虛擬手掌接收反饋信號，通過這種方式讓猴子僅依靠紋路就能區分物品。據悉，參與這次試驗的兩只猴子，一隻嘗試了4次，另外一隻嘗試了9次，就學會選擇正確的的物品。這幾次試驗表明，事實上猴子們能夠感覺到物品而不是隨機選取的。尼可雷里斯認為在靈長類動物身上的成功使我們相信將來人類能夠更容易的完成同樣的任務。這些結果進一步證實創造一個機器肢體來幫助嚴重癱瘓病人探索世界和接受外界信息是可行的，這個肢體由病人自己的腦電波控制來幫助他們獨立移動。同時，肢體上的感測器會生成反饋信號幫助大腦分辨物品的紋理、形狀和溫度，以及他們要走的道路的路況。 目前，這種治療方式被一個名為「再次行走」的國際非盈利組織採用，這個組織是由巴西、美國、瑞士、德國等國家的科學家建立的，他們的目標是讓全身癱瘓的病人通過腦電波晶元與全身機器肢體連接回復行走。最近國際科學組織提出建議，在2014年巴西足球世界盃開賽前對獨立的機器肢體進行第一次公開演示。

5. 生物技術專業的論壇有哪些啊，關於動物細胞培養的基本技術哪位了解

生物幫就不錯，這是一個生物行業門戶網站，生命科學領域產品、技術文檔、視頻資源豐富，而且還可以在線問答，幫助你解決遇到的問題。不論對於整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個必不可少的過程，是生物技術中最核心、最基礎的技術。
參考：
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6. 生物學科網哪個比較好

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7. 重組質粒的連接、轉化及篩選實驗方法的實踐誰能總結一下，我寫生物論文需要了解一下這方面的知識

生物幫，依託互聯網，在注重科學性、實用性和權威性的前提下，面向生物研究者、企業和研究機構，提供最新、領先、精準、高效、全面的生物產品和技術信息。樓主可以去那裡查看一下啊。 [實驗要點總結]1、DNA連接酶用量與DNA片段的性質有關，連接平齊末端，必須加大酶量，一般使用連接粘性末端酶量的10-100倍。2、在連接帶有粘性末端的DNA片段時，DNA濃度一般為2-10mg/ml，在連接平齊末端時，需加入DNA濃度至100-200mg/ml。3、連接反應後，反應液在0℃儲存數天，-80℃儲存2個月，但是在-20℃冰凍保存將會降低轉化效率。4、粘性末端形成的氫鍵在低溫下更加穩定，所以盡管T4 DNA連接酶的最適反應溫度為37℃，在連接粘性末端時，反應溫度以10-16℃為好，平齊末端則以15-20℃為好。5、在連接反應中，如不對載體分子進行去5'磷酸基處理，便用過量的外源DNA片段(2-5倍)，這將有助於減少載體的自身環化，增加外源DNA和載體連接的機會。6、LB選擇性瓊脂組成的平板，在含有適當抗生素時，攜有載體DNA的轉化子為淡紅色菌落，而攜有帶插入片段的重組質粒轉化子為白色菌落。該產品篩選效果同藍白斑篩選，且價格低廉。但需及時挑取白色菌落，當培養時間延長，白色菌落會逐漸變成微紅色，影響挑選。7、X-gal是5-溴-4-氯-3-吲哚-b-D-半乳糖(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-galactoside)以半乳糖苷酶(b-galactosidase)水解後生成的吲哚衍生物顯藍色。IPTG是異丙基硫代半乳糖苷(Isopropylthiogalactoside)，為非生理性的誘導物，它可以誘導lacZ的表達。8、在含有X-gal和IPTG的篩選培養基上，攜帶載體DNA的轉化子為藍色菌落，而攜帶插入片段的重組質粒轉化子為白色菌落，平板如在37℃培養後放於冰箱3-4小時可使顯色反應充分，藍色菌落明顯。 如果有空的話可以去生物幫（ MALINGS.www.bio1000.com/ ）那裡看下，實驗的步驟，細節，以及注意事項，都有介紹的

8. 想找一個生物學網站或者論壇，了解免疫組化的原理以及流程的介紹

我知道一個，比較專業的網站，是生物幫，上面有大量的資訊，生物幫是生物行業門戶網站，信息內容豐富、科學、專業，樓主想了解生物科學方面的技術，資訊。

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