土壤微生物測定
,加入蒸餾水,小心震盪。
2作為土壤微生物,應為它們種類繁多,如果真菌的顏色不明,要有一個提取的過程。
1,可以用高倍的光學顯微鏡.製作土壤浸出液。
4:取干凈土壤.培養:使用完全培養皿,滴入浸出液,培養
3.長出菌落後,根據菌落的形狀大小,有些是真菌菌落,有些是細菌菌落,真菌菌落可先用肉眼觀察,再都製成生物塗片,分層後取出上層清液。觀察真菌可以用較低倍數的光學顯微鏡,可染色處理,對於細菌的觀查,共生在一起,要想觀察好
Ⅱ 土壤微生物的檢測怎麼做,哪裡可以做
土壤微生物是土壤中一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱,嚴格意義上應包括細菌、古菌、真菌、病毒、原生動物和顯微藻類。其個體微小,一般以微米或毫微米來計算,通常1克土壤中有幾億到幾百億個,其種類和數量隨成土環境及其土層深度的不同而變化。它們在土壤中進行氧化、硝化、氨化、固氮、硫化等過程,促進土壤有機物的分解和養分的轉化;那土壤內的微生物如何測定呢,下面喆圖小編帶大家來了解一下。
一、培養方法
(1)稀釋平板塗抹法
具體操作如下:
①准確稱取 10g(精確到 0.001)採集的鮮土,倒入裝有 90 ml 無菌水的 500 ml 的三角瓶中,置於往返震盪機上(120r/min,常溫),震盪 20 min,使土壤充分分散成為土壤懸液。
②將上面的土壤懸液用無菌移液管吸取 5 ml 到 45 ml 稀釋液中,即為 10-2稀釋度,依次按 10倍法稀釋,製成 10-1~-~10-6稀釋度。注意:每次吸取懸液時,在稀釋液中反復吸入和吹出 3-~5 次,減少因管壁吸附而造成的誤差,並使懸液進一步分散,每個稀釋度需要更換無菌吸管吸取懸液。)
③根據各類微生物在土壤中的數量多少選擇適當稀釋度的懸液接種。本實驗選擇細菌的稀釋度為 10-~10-5,放線菌為 10~-10-4,真菌為 10-1~-10-3。 -3-2
④土壤懸液的接種方法:在無菌培養皿中倒入 15~20 ml 選擇性培養基,待凝固後,用 0.2 ml無菌移液槍吸取0.2 ml各稀釋度的土壤懸液,然後立即用塗抹棒將懸液均勻的塗抹於培養基表面。用同一支吸管接種時,從高稀釋度開始,依次接種到低稀釋度。
⑤接種了土壤懸液的培養皿,平放在超凈工作台 20~30 min,使得菌液滲透入培養基內,然後倒置於 28~-30°C 生化培養箱中培養一定時間:細菌 1~-3 天,放線菌 10-~14 天,真菌 3~-7 天。
⑥培養結束後,取出培養皿計數。
(2)稀釋培養法
一系列稀釋度的製作與稀釋平板法相同。根據各類微生物在土壤中數量的多少選擇適當的稀釋度,分別接種 1 ml 稀釋液與製作好的液體培養基中,根據需要做 3~4 次重復,適溫培養。2 三大類土壤微生物培養基的分離三大類土壤微生物的分離採用稀釋平板塗抹法,每個菌種要求做 3 個稀釋度,每個稀釋度做3-4次重復,選取細菌和放線菌的菌落在20~-200之間的培養皿、真菌的菌落在 10-~100 的培養皿計數,並計算三次重復的平均值。每克干土中微生物數量計算式:
每克干土中菌落數=(菌落平均數×稀釋倍數×100%)/(濕土質量×干土)
1, 細菌:牛肉膏蛋白腖培養基:牛肉膏 3g、蛋白腖 5g、瓊脂 18g、蒸餾水 1000 ml、pH 值 7.0-~7.2 。
2, 放線菌:改良高氏 1 號培養基:KNO3 1g,FeSO4·7H2O 0.01g,K2HPO4 0.5g,澱粉 20g,MgSO4·7H2O 0.5g、NaCl 0.5g、瓊脂 18g、3%重鉻酸鉀溶液 3.3ml、蒸餾水 1000ml、pH 值 7.2~-7.4
3,真菌:馬丁氏培養基(虎紅瓊脂):蛋白腖 5g、KH2PO4 1g、MgSO4 0.5g、葡萄糖 10g、瓊脂 18.5g、孟加拉紅 0.033g、氯黴素 0.1g、蒸餾水 1000ml。
所有培養基需在濕熱滅菌鍋中121°C滅菌 20-~30min
以上土壤微生物測定方案僅供參考,可以查詢專業公司進行檢測。
Ⅲ 土壤微生物數量的測定方法
取一定重量的土壤,稱取1g,置於100ml無菌水中,充分振盪,然後離心,取上清回液,就得到土壤浸出液(可以看做答土壤中的微生物全部轉移至水中)。然後做梯度稀釋,取一定稀釋度的溶液,塗平板,培養後數菌落數,然後乘上稀釋倍數,就可得到1g土壤中該微生物的數量。
例如,你在稀釋10的7次方的平板上數出了15個菌落,則1g土壤中微生物數量為1.5×10的8次方個。
Ⅳ 測定微生物的生物量有哪些主要方法
聖才學習網為您解答:
1.直接計數測定 根據微生物種類,有血球計數板和細菌計數板;或者用電子計數器計數
2.比濁法 根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度
3.核酸計數法 熒光定量PCR技術
4.活菌計數法 MPN和平板計數法
由於測定方法的限制,前幾種計數結果不太准確,目前應用廣泛的是第四種
對糞大腸菌群和光合細菌可用MPN,對其他微生物可用平板計數法