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1. Western Blot试验方面的问题在哪里可以找到详细介绍，谁能告诉我一些的生物科技论坛

楼主可以到生物帮那里了解这方面的信息的。生物帮拥有覆盖所有实验领域的精品技术文件，图文并茂的提供生物领域的学科知识、实验技术方法与技巧等，协助解决科研工作中相关技术问题。 Western印迹要想做的好，当然每个步骤都不能马虎 配胶 这些小孔的孔径随 “双丙烯酰胺～丙烯酰胺” 比率的增加而变小，比率接近 1：20 时孔径达到最小值。SDS聚丙烯酰胺凝胶大多按“双丙烯酰胺～丙烯酰胺”为1：29 配制，试验表明它能分离大小相差只有3% 的蛋白质。 分离胶及浓缩胶均可事先配好(除AP及TEMED外)，过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡(否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气泡，有条件者可真空抽吸3分钟)，加入10%AP(0.7~0.8:100, 分离胶浓度越高AP浓度越低，15%的分离胶可用到0.5:100)及TEMED(分离胶用0.4:1000, 15%的可用到0.3:1000，浓缩胶用0.8：1000) PAGE配胶的试剂和配方比例对电泳结果的质量当然有决定性的影响，这个配胶的比例，在《分子克隆》上有详细的论述，相信大家都不难查到。容易忽视的问题主要在于过硫酸铵(AP)一定要新鲜——最好用小指管配AP(写日期)保存在-20度，超过2周的AP扔掉算了，或者已经反复打开使用多次的AP都别用， 灌入2/3的分离胶后应立即封胶，胶浓度<10%时可用0.1%的SDS封，浓度>10%时用水饱和的异丁醇或异戊醇，也可以用0.1%的SDS。封胶后切记，勿动。 如用醇封胶需用大量清水及ddH2O冲洗干净，然后加少量0.1%的SDS，目的是通过降低张力清除残留水滴 10%的AP最好现配现用，如在4℃存放勿超过两周。30%的丙烯酰胺如有沉淀，最好弃掉 过硫酸铵(APS)(10%;w/v) 取3g过硫酸铵，溶于去离子水，至终体积为30mL。此溶液4℃下在短暂的数日内是稳定的，但建议，对每一组新胶均应新鲜配制 但摇动溶液时不要过于剧烈以免引入过多地氧气 可以到生物帮那里详细的了解一下，我找到了相关专题，可以帮到你。 please click to connect www.bio1000.com/zt/protein/214560.html . can help you 样品处理 先制备蛋白样品，后灌注压缩胶，压缩胶灌注后应在20~40min内使用。 上样前蛋白样品最好离心，上样量不宜过多，以免看结果时，每个条带都弯弯地“笑”你贪多嚼不烂哦。其他的操作，按照说明控制电流，不要过多重复使用电泳Buffer(别小气，重复使用会降低缓冲能力的)，好像基本不会出问题了。当预染的Marker告诉你，你要分辨的蛋白已经到达最佳分辨区——分离胶的2/3处，OK，电泳结束了。 电泳样品假如样品缓冲液后,要在沸水中煮3-5分钟使SDS与蛋白质充分结合形成SDS-蛋白质复合物 溴酚蓝指示剂是一个较小的分子,可以自由通过凝胶孔径,所以它显示着电泳的前沿位置,当指示剂到达凝胶底部时,即可停止电泳. 另外样品处理液中也可加入适量的甘油或蔗糖以增大溶液密度,使加样时样品溶液可以沉入样品加样槽底部. 样品制备是关键步骤，要求尽可能的获得所有蛋白质，应注意以下问题： 1：在合适的盐浓度下，应保持蛋白质的最大溶解性和可重复性。 2：选择合适的表面活性剂和还原剂，破坏所有非共价结合的蛋白质复合物和共价键二硫键，使其形成一个各自多肽的溶液。 3：尽量去除核酸，多糖，脂类等干扰分子。 4：防止蛋白质在样品处理过程中的人为的修饰，制备过程应在低温下进行，以避免细胞破碎释放出的各种酶类的修饰(建议加入合适的蛋白酶抑制剂) 5：样品建议分装成合适的量，然后冷冻干燥或直接以液体状态置-80℃中保存，但要注意不要反复冻融。 电泳 所有蛋白样品调至等浓度后上样，样品两侧的泳道用等体积的1×loading buffer上样，Marker也用1×loading buffer调整至与样品等体积 低电压短时间的预电泳(恒压10-20V,20-30min)，清除凝胶内的杂质，疏通凝胶孔径以保证电泳过程中电泳的畅通 以初始电压为45V时的电流强度进行稳流电泳，当电压达65V时改为稳压电泳 注意加样时间要尽量短，以免样品扩散，为避免边缘效应，可在未加样的孔中加入等量的样品缓冲液 凝胶上所加电压为8V/cm。当染料前沿进入分离胶后，把电压提高到15V/cm 转膜 由于转膜过程中的气泡问题对于实验结果有很大的影响 切记：每层之间用滴管将其中的气泡全部赶出，决不允许气泡存在。 将PVDF膜先在甲醇中浸泡几分钟,再转移到转膜缓冲液中处理15min。 PVDF膜，125-200 ug/cm2(适合于SDS存在下与蛋白质的结合) 另外提醒一句：由于NC膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代替，因此在封闭时最好使用较温和的Tween20，而且浓度不要超过0.3%(据说0.05%效果最好) PVDF膜特别注意的是需要100%甲醇预处理(不超过15秒)再用缓冲液平衡，才能用 如果WB前没有可参考的资料——比如不知道是否有表达，比如抗体少还要摸条件(稀释度)，可以用剪膜剩下的边角料来先做几组点杂交摸条件，省点时间省点试剂; 切个小角是常用的方法。膜上要做好标记，识别正反面和上下 膜彻底浸润后颜色会变深一点，任何白点或者斑都是没有完全浸润的标志，会影响转膜的 半干电转移要防止过热 转膜后，膜上其他的空白位置需要用封闭液封闭。Western的灵敏度某种程度上受限于封闭做的好不好 切记。封闭时间和封闭剂的量都要足够。封闭不完全，后面就全白忙活了

2. 生物医学工程，单克隆抗体的制备及应用方面的资料哪里会有

单克隆抗体是高度均质性的特异性抗体，由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。单克隆抗体的制备在生物学、医学方面有重要意义。你可以到生物帮找单克隆抗体的制备及应用方面的资料，生物帮是一个比较全面的生物科学网站。

有时间的话可以去（
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3. X-gal和IPTG溶液配制方法哪位知道这类生物实验知识哪里可以了解到

我在生物帮那儿帮你找到了X-gal和IPTG溶液配制方法，你看下吧X-gal溶液配制方法X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。IPTG溶液配制方法IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238.3），在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。 如果还有关于实验的问题也可以去（ MALINGS.www.bio1000.com/ ）那里查找的，生物帮那里的技术文档，视频教程可以帮助你解决遇到的问题。

4. 利用芯片灵长类可脑电波控制虚拟手臂这方面的介绍哪里有

目前，在美国杜克大学的神经系统研究中心，第一次演示了一个灵长类大脑和一个虚拟身体之间的双向联系，科学家训练两只猴子学习只使用脑电波来移动虚拟手臂和分辨虚拟物体的纹路。实验过程猴子的任何身体部分都没有参与操作，这就表明将来脊椎神经损伤严重的瘫痪患者可以利用这个技术，不仅能重新移动也能重新恢复触觉。这一研究成果发表于10月5日出版的《自然》杂志。你可以去生物帮那里了解，生物帮是生物行业门户网站，那儿有全面的生命科学领域产品、技术文档、视频、还可以在线交流。
被植入电脑芯片的猴子能够看到和移动虚拟物品并分辨物体的纹路，这表明在帮助严重瘫痪病人再一次接触社会的探索上更进了一步。杜克大学医学和哲学博士米格尔-尼可雷里斯说：“在不久的将来，四肢瘫痪的病人将利用这项技术，不仅能够移动手臂和再次行走，而且能够感觉到手中物品的纹路，或者通过安装的机器肢体能够体会到纹路的细微差别。”他是美国杜克大学医学中心神经生物学教授和神经系统研究中心主任，在这一领域有较深的资历。猴子们通过脑电波控制虚拟手臂放到虚拟物品的表面，并且通过接触能够分辨它们的纹路。尽管研究中使用的虚拟物品外观相同，它们被设计成不同的纹路来测试猴子是否能通过脑电波直接控制虚拟手臂分辨其中不同。虚拟物品的纹路以微弱的电信号传输到猴子的大脑，三种不同的电信号就代表三种不同的纹路。可参考：please click to connect www.bio1000.com/zt/dna/3782.html .hope that i can help you尼可雷里斯说：“这是第一次演示大脑和虚拟身体之间通过电脑芯片建立双向的直接连接，当虚拟手臂触摸并产生反馈信号，传送的的电信号刺激动物脑皮层的另外一个区域，从而实现脑电波直接控制虚拟身体。”“我们期待未来的几年内这项技术能够帮助那些不能移动的或者从未体验过外面世界的病人重新独立生活。这也是第一次我们观察大脑控制虚拟手臂接触物体的同时大脑接收虚拟手臂获得的描述物体细微结构的电信号”，尼可雷里斯补充道。由猴子大脑运动皮层的50-200个神经元群体组合成的脑电波控制虚拟手臂的移动，与此同时，触觉皮层成千上万的神经元从虚拟手掌接收反馈信号，通过这种方式让猴子仅依靠纹路就能区分物品。据悉，参与这次试验的两只猴子，一只尝试了4次，另外一只尝试了9次，就学会选择正确的的物品。这几次试验表明，事实上猴子们能够感觉到物品而不是随机选取的。尼可雷里斯认为在灵长类动物身上的成功使我们相信将来人类能够更容易的完成同样的任务。这些结果进一步证实创造一个机器肢体来帮助严重瘫痪病人探索世界和接受外界信息是可行的，这个肢体由病人自己的脑电波控制来帮助他们独立移动。同时，肢体上的传感器会生成反馈信号帮助大脑分辨物品的纹理、形状和温度，以及他们要走的道路的路况。 目前，这种治疗方式被一个名为“再次行走”的国际非盈利组织采用，这个组织是由巴西、美国、瑞士、德国等国家的科学家建立的，他们的目标是让全身瘫痪的病人通过脑电波芯片与全身机器肢体连接回复行走。最近国际科学组织提出建议，在2014年巴西足球世界杯开赛前对独立的机器肢体进行第一次公开演示。

5. 生物技术专业的论坛有哪些啊，关于动物细胞培养的基本技术哪位了解

生物帮就不错，这是一个生物行业门户网站，生命科学领域产品、技术文档、视频资源丰富，而且还可以在线问答，帮助你解决遇到的问题。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，是生物技术中最核心、最基础的技术。
参考：
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6. 生物学科网哪个比较好

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7. 重组质粒的连接、转化及筛选实验方法的实践谁能总结一下，我写生物论文需要了解一下这方面的知识

生物帮，依托互联网，在注重科学性、实用性和权威性的前提下，面向生物研究者、企业和研究机构，提供最新、领先、精准、高效、全面的生物产品和技术信息。楼主可以去那里查看一下啊。 [实验要点总结]1、DNA连接酶用量与DNA片段的性质有关，连接平齐末端，必须加大酶量，一般使用连接粘性末端酶量的10-100倍。2、在连接带有粘性末端的DNA片段时，DNA浓度一般为2-10mg/ml，在连接平齐末端时，需加入DNA浓度至100-200mg/ml。3、连接反应后，反应液在0℃储存数天，-80℃储存2个月，但是在-20℃冰冻保存将会降低转化效率。4、粘性末端形成的氢键在低温下更加稳定，所以尽管T4 DNA连接酶的最适反应温度为37℃，在连接粘性末端时，反应温度以10-16℃为好，平齐末端则以15-20℃为好。5、在连接反应中，如不对载体分子进行去5'磷酸基处理，便用过量的外源DNA片段(2-5倍)，这将有助于减少载体的自身环化，增加外源DNA和载体连接的机会。6、LB选择性琼脂组成的平板，在含有适当抗生素时，携有载体DNA的转化子为淡红色菌落，而携有带插入片段的重组质粒转化子为白色菌落。该产品筛选效果同蓝白斑筛选，且价格低廉。但需及时挑取白色菌落，当培养时间延长，白色菌落会逐渐变成微红色，影响挑选。7、X-gal是5-溴-4-氯-3-吲哚-b-D-半乳糖(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-galactoside)以半乳糖苷酶(b-galactosidase)水解后生成的吲哚衍生物显蓝色。IPTG是异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylthiogalactoside)，为非生理性的诱导物，它可以诱导lacZ的表达。8、在含有X-gal和IPTG的筛选培养基上，携带载体DNA的转化子为蓝色菌落，而携带插入片段的重组质粒转化子为白色菌落，平板如在37℃培养后放于冰箱3-4小时可使显色反应充分，蓝色菌落明显。 如果有空的话可以去生物帮（ MALINGS.www.bio1000.com/ ）那里看下，实验的步骤，细节，以及注意事项，都有介绍的

8. 想找一个生物学网站或者论坛，了解免疫组化的原理以及流程的介绍

我知道一个，比较专业的网站，是生物帮，上面有大量的资讯，生物帮是生物行业门户网站，信息内容丰富、科学、专业，楼主想了解生物科学方面的技术，资讯。

你可以到生物通上面（
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